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        病理科活體組織檢查的運用
        發布時間:2018-08-10
        摘要

          Abstract:Biopsy is an important method to diagnose the disease by taking the living tissue of human body for pathological examination. It is mainly used for the identification of tumors and non-neoplastic diseases, benign and malignant tumors and the judgment of the growth, invasion and metastasis of malignant tumors and range. This article analyzes the application of biopsy in pathology and its prospect.

          Keyword:Biopsy; Pathology; Application; Prospect;

          活體組織檢查 (Biopsy) 簡稱“活檢”, 也稱外科病理學檢查, 是指配合醫院臨床診斷、治療的需要, 從患者體內或體表切取、鉗取或穿刺等取出病變組織, 進行病理學檢查的技術, 被作為臨床的最后診斷。

        病理科活體組織檢查的運用
         
          1、活檢在病理科的應用

          活檢的過程是接收臨床送檢標本→肉眼觀察送檢的標本→取材→固定→洗滌→脫水→透明→浸蠟→包埋→石蠟切片→展片→貼片→烤片→脫蠟至水→HE染色→脫水透明→封片→病理醫生在光學顯微鏡下觀察組織切片。通過對病變組織及細胞形態的分析, 結合肉眼觀察及臨床資料, 做出疾病的診斷。對一些疑難病例, 再通過組織化學、免疫組化、電子顯微鏡、分子生物學技術進行輔助診斷。組織石蠟切片HE染色是臨床診斷的重要輔助手段[1]。石蠟切片粘貼牢固, HE染色對比分明, 保存時間長, 組織蠟塊同患者病案一樣, 可被長期封存, 所以被國內外各大醫院病理科廣泛日常應用。

          2、石蠟切片的要點分析

          2.1、組織標本處理

          病理科在接收標本時要做到七對一查, 即:七對是病理申請送檢單和標本瓶及標本袋上標的姓名、年齡、性別、病歷號、取材部位、送檢內容、送檢組織塊數七個方面的認真核對;一查是仔細查看標本有無, 標本是否用固定液固定過。臨床送檢標本要新鮮, 避免造成細胞自溶。每取完一例標本后, 所有的工具如刀、剪、盤鑷、取材臺面等, 必須用水沖洗干凈, 以免影響下一病例標本, 避免交叉污染, 尤其在取小標本時更要注意。使用器械要適當, 如應該用平鑷子則不能用有鉤鑷子, 不能鈍刀擠壓組織, 要用鋒利刀拖切, 用力要恰當, 以免擠壓組織, 影響組織學觀察分析。

          組織取材完畢后即刻放入事先打印好號碼的脫水盒內, 放入全密閉柜式電腦控制自動組織脫水機中進行固定、洗滌、脫水、透明、浸蠟, 這些過程在真空負壓的條件下來進行, 設置電腦控制程序時要注意, 選用10%中性緩沖福爾馬林固定液效果比較好, 現配現用[2]。充分洗滌, 殘留的固定液對后續染色有影響。脫水的酒精要從低濃度到高濃度, 掌握好時間。浸蠟一定要根據石蠟的特點, 根據季節的不同, 合理使用不同熔點的石蠟。包埋時注意, 小的多塊的組織比如胃鏡腸鏡組織應包埋在一起而且保證在同一水平面上, 深淺不一的包埋會使有的組織被切上, 有的組織切不上或被修削去[3]。

          2.2、石蠟切片

          組織經過之前一系列的處理后, 形成蠟塊, 可以上輪轉式石蠟切片機開始切片, 切片可以驗證前面系列處理程序是否合適。切片時, 用力和速度要均勻, 否則容易引起切片厚薄不一。如果組織過硬, 可將蠟塊放到95%乙醇甘油1∶1混合液中浸泡軟化再行切片;出現組織過軟, 將蠟塊重新浸蠟后包埋切片。展片用自來水即可, 水溫一般45℃左右, 溫度過高則蠟帶產生小氣泡, 溫度過低則皺褶不易展平, 影響顯微鏡下觀察。貼片要求位置恰當并且貼附牢固, 染色時才不至脫落[4]。

          2.3、HE染色

          切片用新的二甲苯脫蠟, 夏天5 min就可脫蠟干凈, 冬季脫蠟時間應延長至15 min。脫蠟前可以先烤片使切片上的蠟處于熔解狀態, 這樣脫蠟較迅速;脫蠟試劑要及時更換[5], 鹽酸酒精分化很關鍵, 分化時間一般控制在5 s以內, 可以肉眼觀察切片從深藍色變為粉紅色時立刻從分化液中取出終止分化, 再立刻藍化, 初學者應該在光鏡下多次觀察切片除胞核外無其他背景著色時停止分化。自來水沖洗藍化切片是最好的, 后續也可加一步驟用溫熱水來促使切片藍化, 這對于切片的保存較為有利。伊紅染色之后要注意, 低濃度的酒精褪色能力強, 如果掌握不好時間, 染上的伊紅便會被褪去大部分。作為切片脫水劑的酒精, 要經常更換[6]。

          3、前景分析

          現今, 活體組織檢查已經廣泛應用于病理科臨床診斷以及醫學院校科研工作中, 活檢在醫療診斷中具有重要地位。超微結構病理學、組織化學和細胞化學、免疫病理學、遺傳病理學、分子病理學、免疫組織化學這些病理學的重要研究手段都離不開活檢。以分子病理為例, 分子病理學是在基因水平上用分子生物學技術研究疾病發生發展的一個病理學分支學科, 所進行的檢測通常稱之為基因檢測, 即取檢測者的腫瘤活體組織、胸水或血液等, 經提取和擴增其基因信息后, 通過相應的分子生物學技術, 對被檢測者細胞中的DNA分子的基因信息進行檢測, 分析基因狀態, 最終對腫瘤的診斷和治療提供幫助。少數疑難病例和罕見類型, 當病理形態學和應用免疫組化分析仍難以確診時, 則需要通過基因檢測來鑒別診斷, 尋找基因水平的異常改變, 為確診病變的性質提供依據。分子病理診斷的臨床應用將會進一步擴展經典病理學診斷的內涵, 將傳統的形態診斷外延到腫瘤發生易感性、基因與染色體變化、基因路徑與基因治療、生物學行為評估、對藥物治療反應的評價、臨床預后的預測等醫療全過程之中, 這些都是以活體組織檢查為基礎。

          參考文獻
          [1]張偉強, 王鳳琴.淺析病理石蠟切片的質量控制[J].診斷病理學雜志, 2016, 23 (4) :309.
          [2]印敏, 徐有坤, 李煥萍, 等.病理切片制作全程質量控制的實踐[J].中國實用醫藥, 2011, 6 (6) :231-232.
          [3]張中海.病理切片制作過程中常見問題及原因探析[J].吉林醫學, 2011, 32 (27) :5761.
          [4]劉毓玲, 周林, 許愛萍.石蠟對病理組織切片的影響[J].臨床與實驗病理學雜志, 2017, 33 (4) :462-463.
          [5]韋翠容.提高病理組織石蠟切片質量的策略研究[J/CD].臨床醫藥文獻電子雜志, 2017, 4 (27) :5345-5346.
          [6]樊秋紅.病理HE染色制片與質量控制方法研究及分析[J].醫藥前沿, 2017, 7 (27) :375-376.
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